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病理学分享——免疫组化(IHC)操作流程
2024-08-11
1. 洗载玻片:将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸 附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上,置于37°C温箱中,将多聚赖氨酸涂布于玻片的表面,由于L...
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病理染色之 VanGieson染色
2024-08-10
VanGieson染色简称VG染色,是一种成熟的结缔组织染色方法,用于区别胶原纤维和肌纤维。其操作简单,结果可靠,是实验室常规特染方法之一。在Van Gieson 染色中品红和苦味酸的比例关系一般为1:9,但由于被染色的组织不同以及组织处理方法的不同在实际应用时应根据染色的实际效果进行必要的调整以达到红黄两色适当的对比。染色步...
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革兰染色|细菌形态学观察
2024-08-09
一、实验原理1、G+细胞壁结构致密(肽聚糖层厚),且脂质少,乙醇不易渗入脱色;G-细胞壁结构疏松,且脂质含量多,乙醇易溶解脂质渗入脱色;2、G+菌体含有大量核糖核酸镁盐,可与碘、结晶紫牢固结合,使已着色的细菌不易被乙醇脱色;G-含量少,易脱色;3、G+等电点(pl2~3)比G-等电点(pl4~5)低,在同一pH条件下,G+比G-所带的负...
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免疫组化(IHC)|超详细的protocol
2024-08-08
实验步骤(1)摊片:切片放65℃摊片机40min-1h。(2)脱蜡水化:二甲苯Ⅰ(10min)→二甲苯Ⅱ(10min)→100 % 乙醇Ⅰ(10 min)→100 % 乙醇Ⅱ(10 min)→95 % 乙醇(5 min)→85 % 乙醇(5 min)→ 75 % 乙醇(5 min)(3)洗片:双蒸水洗5min×3次,PBS洗5 min×3次。(4)阻断:3% 过氧化氢37℃ 阻断20min,PBST 5 min...
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免疫荧光染色,零失误封片技巧
2024-08-07
免疫荧光染色是实验室常用的技术之一,但在操作过程中,有许多需要注意的细节,任何一个环节的失误都可能导致实验失败。本文将为您介绍免疫荧光染色的注意事项,并附上零失误封片技巧。1. 抗体选择:选择针对您研究的目标蛋白特异性高、亲和力强的抗体,一抗的浓度需要预实验摸索。一抗浓度过高(本身荧光实验,一抗的浓度就...
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瑞氏-吉姆萨染色 原理 步骤
2024-08-06
瑞氏-吉姆萨染色(Wright-Giemsa Staining)原理:瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成。血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合呈红色;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性蛋白质,与碱性染料美蓝或天青结合,呈紫蓝色;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,呈淡紫色。吉姆萨染料由伊红,天青组成...
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