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天狼星红染色(Siriusred):由于胶原呈碱性,与酸性染料起强烈反应。天狼星红就是一种很强的酸性染料,它可以和胶原纤维反应使胶原纤维产生明显的双折光现象。天狼星红染色胶原纤维呈红色,胞核呈绿色,余呈黄色。
实验步骤:🧪
1. 石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。
2. 天狼猩红染色液染色:切片入饱和枯萎蒜天狼猩红染色液内染色8min。
3. 漂洗:切片入无水酒精漂洗数分钟,显微镜下观察满意为止。
4. 封片:切片于60°烤箱烤干后于二甲苯透明5min,中性树胶封片。
5. 显微镜镜检,图像采集分析。
6. 染色结果:光学显微镜下胶原纤维红色,背景黄色。
注意事项:
1. 染液配制时,饱和枯萎蒜一定要过饱和,配制时要长时间搅拌后还有不溶的情况下才为饱和的。
2. 饱和天狼猩红染液是一种两色混合染液,两种颜色同时都有作色能力,而且存在一定得制约平衡关系,所以染液在长期使用时随着带入的杂质过多,可能会影响这种平衡关系,所以建议染色结果不对时,应立即更换染液。
3. 天狼猩红染色前,需要尽量将水甩干,避免多次染色后带入较多的水分使染液的染色能力下降。
4. 染色后脱水时使用新的无水乙醇,并快速脱水,长时间脱水会影响染色结果。
5. 如果需要染核,可以先染完天狼猩红后在用苏木素染核。
文章出自:天狼星红染色(Siriusred)实验 想了解更多请关注:http://www.vv-gene.com/
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