苏木精-伊红染色法 ( Hematoxylin-Eosin staining )，简称HE染色法 ，切片技术里常用的染色法之一  。

苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。

以心脏HE染色为例子，小鼠取材后，将心脏置于预冷的PBS中冲洗干净，用干净的滤纸吸干水分后，置于4%多聚甲醛内固定24h以上，之后通过梯度脱水（机器脱水步骤）：70%乙醇溶液30min--80%乙醇溶液30min--90%乙醇溶液30min--95%乙醇溶液30min--无水乙醇60min--无水乙醇60min----二甲苯60min--二甲苯60min----石蜡60min--石蜡60min--石蜡60min
脱水结束后，对心脏组织进行石蜡包埋。（铁皮盒进行包埋，按照自己要切的位置进行一个包埋）

切片，切片机切成5um厚度的组织，可提前将组织块放入冰水混合物中浸泡一会儿，这样切出来的组织不会有裂痕，每张黏附载玻片上3~4个组织即可。
之后就可以开始准备后续的染色啦

1脱蜡

二甲苯10min--二甲苯10min--无水乙醇5min--无水乙醇5min--95%乙醇5min--85%乙醇5min--70%乙醇5min----纯水5min

二甲苯的作用：脱去切片中的石蜡，起透明作用，使切片更容易观察，使后面步骤染液充分进入组织中

乙醇的作用：洗脱二甲苯，使水进入组织中，充分水化。

2.染色 （针对不同的组织、器官，染色时间需要自己摸索）

苏木素4min--自来水冲洗10min--盐酸乙醇分化3s--自来水冲洗10min（返蓝）--伊红25s~1min
盐酸乙醇的作用：使细胞核中结合过多的染液和细胞浆中多余的染液被除去。

3.脱水

无水乙醇5min--无水乙醇5min--无水乙醇5min

4.透化

二甲苯10min--二甲苯10min--二甲苯10min

5.封片

中性树脂封片后待其自然晾干即可置于显微镜下拍照观察。

注意：苏木素染过可用盐酸分化使颜色变淡；伊红过染可用70%乙醇洗使颜色变淡。

片子不可在空气中长时间暴露，会变黑，因此从二甲苯取出直接封片，不然会影响后面的拍照观察

文章出自：苏木精-伊红染色实验      想了解更多请关注：http://www.vv-gene.com/