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一、前期准备
1. 对病理标本进行切片处理,并通过HE染色及病理复诊,明确实验所需组织的范围并加以标记。
2. 根据实验目的,设计组织芯片阵列的组织类型和排列方式,确保阵列的合理性和科学性。
二、选取组织样本
1. 根据复诊标记及阵列设计,精准选择对应的组织病例编号。
2. 按照组织病例编号,从组织库中提取组织蜡块和对应的HE染色切片。
三、蜡块制备
1. 制备合适的空白受体蜡块,确保其质量与组织蜡块相匹配。
2. 使用组织阵列仪,按照预设阵列设计将病理蜡块组织芯规律地排列在空白受体蜡块上,制备成组织阵列块。
四、蜡块融合与修整
1. 将组织阵列块置于52℃恒温烤箱中加热融合,使组织芯与受体蜡块紧密融合。
2. 使用用的是半自动切片机,以适宜的进刀速度对组织阵列块进行修整,确保80%的组织芯完全曝露。
五、切片制备与保存
1. 对修整后的组织阵列块进行切片处理,切片厚度为4μm,并裱附在防脱处理的载玻片上。
2. 组织芯片经充分干燥后,置于60℃恒温烤箱中烤片16个小时,以增强其稳定性。
3. 对组织芯片进行编号并保存,抽取一张作HE染色。
4. 病理医生对抽检的组织芯片中的每一个组织样本进行复诊质检,确保质量达标。质检结果由信息部输入组织芯片数据库。
5. 最后,将组织芯片白片敷蜡后,置于放在阴凉处储存,以便后续使用和研究。
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