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荧光原位杂交实验(FISH)
2024-08-23
1、概念:荧光原位杂交(FluorescenceinsituHybridization,简称FISH)是一种基于核酸杂交原理的分子生物学技术,主要用于在细胞或组织中定位和检测特定的DNA或RNA序列。它使用荧光标记的探针,这些探针是与目标序列互补的核酸片段,通过杂交反应与目标序列结合,然后通过荧光显微镜观察和定位。2、 ...
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Tunel染色观察细胞调亡
2024-08-22
1⃣️石蜡包埋、切片、脱水;67°C,30min 烤干切片2⃣️石蜡切片脱蜡至水;3⃣️抗原修复切片稍用于后用【免疫组化笔】在组织周围画圈(防止液体流走),在圈内滴加【蛋白酶K工作液】覆盖组织,室温孵育20min,37C;将玻片置于PBS洗涤 5min,重复3次;4⃣️切片稍甩干后在圈内滴加【破膜工作液 】(20ul 110%柠檬酸钠+20ul10%...
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投射电镜制样步骤
2024-08-21
1 、取材固定:离心收集细胞或细菌沉淀,要求沉淀最少绿豆大小。去培养基加入电镜固定 液 4℃重悬混匀固定 2-4h ,4℃固定保存及运输。2 、琼脂预包埋:细胞或细菌用离心机离心,弃上清加入 0. 1M 磷酸缓冲液 PB(PH7.4) , 混匀漂洗 3min 后再离心,重复洗涤 3 次。提前加热溶解制备 1%琼脂糖溶液,稍冷却后加 入 EP 管内...
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组织冰冻切片染色步骤
2024-08-20
(1)切片后固定,固定时间为30s-1min,清水稍冲洗1-2s。(2)玻片浸没于含苏木素的染缸中,时间大概为3-5min;然后清水洗去苏木素,大概5-10s。(3)再把玻片浸没于1%盐酸乙醇2s;然后清水冲洗1-2s。这个时候在显微镜下观察,细胞核呈紫蓝色,细胞浆无色说明操作无误。(4)促蓝液(可以是自来水,或者是1%氨水)返蓝5-10s;清水稍冲洗1...
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组织病理学分享——高尔基染色实验操作流程
2024-08-19
①原理高尔基染色包括银 Golgi 染色和汞 Golgi 染色技术。银 Golgi 染色原理:浸泡脑组织的重铬酸钾溶液与硝酸银溶液发生反应,生成黑色的铬酸银沉淀,由于组织的嗜银性而沉积于神经细胞中。银高尔基技术主要有两种被广泛应用:快速 Golgi 法和 Golgi- Kopsch 法。汞 Golgi 染色原理:由于银 Golgi染色存在一定缺陷,Cox 对高尔...
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详解Trap染色原理及步骤
2024-08-18
染色原理抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP) 是破骨细胞的特异性标志酶,酒石酸盐抵抗的酸性磷酸酶在酒石酸环境中,水解荼酚磷酸盐,产生的 a-蔡酚与重氮副品红偶联形成不溶性的紫红色沉淀。骨组织中的破骨细胞分泌酒石酸盐抵抗的酸性磷酸酶,用此方法可显示骨组织中破骨细胞的活性.此方法适用于...
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