高尔基染色法的基本原理‌12

高尔基染色法（Golgi staining）是一种经典的染色方法，主要用于观察‌神经元和‌胶质细胞的形态结构。‌其技术原理主要依赖于染色剂的特异性亲和性和细胞的嗜银特性。‌高尔基染色试剂盒中的染色剂具有特异性亲和性，能够与神经元和胶质细胞中的特定成分（如蛋白质、核酸等）结合，从而在显微镜下呈现出清晰的形态结构。此外，神经元和胶质细胞具有嗜银特性，这使得它们在高尔基染色过程中能够被特定的银盐溶液（如重铬酸钾、铬酸钾和氯化汞等）浸润并标记。经过一系列化学反应后，这些银盐会在细胞内形成可见的黑色沉淀物，从而清晰地勾勒出神经元的轴突、树突以及树突棘等细微结构。

高尔基染色法的操作步骤

1.取材：将老鼠杀死后，立刻取脑组织置于固定液中固定48小时以上。

2.高尔基染色：将脑组织切成2-3毫米厚的组织块，用生理盐水漂洗几遍，置于高尔基染液中浸泡14天（每隔3天换一次新染液）。

3.组织处理：蒸馏水浸洗3次，倒入80%的冰醋酸浸没组织，过夜，待组织变软后蒸馏水洗，置于30%的蔗糖中。

4.切片：用振荡切片机将组织切成100微米，贴在明胶玻片上，晾干。

5.显影定影：晾干后的组织玻片以浓氨水处理15分钟，蒸馏水洗1分钟，酸性坚膜定影液处理15分钟，蒸馏水洗3分钟，晾干，甘油明胶封片。

6.显微镜镜检：用显微镜观察并采集图像。

文章出自：高尔基染色法      想了解更多请关注：http://www.vv-gene.com/