尼罗红荧光染色溶液是一种旨在通过与脂类物质的结合并发出荧光检测信号，快速、敏感、可靠地活体定量测定细胞内脂类成分的常用荧光染料。适用于各种细胞包括细菌细胞，也用于蛋白质电泳染色。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，着色清晰灵敏。

尼罗红染色剂是一种亲脂性的恶嗪类荧光染料。与脂类物质包括腊酯（wax ester）和三酰甘油（triacylglycerol）以及各种脂肪酸结合后，在激发波长543nm的激发下，显示强烈桔红色荧光（散发波长598nm）。同时在紫外光的照射下显示红色。

实验开始前，将试剂盒里的染色液（Reagent A）冻融，置入冰槽里。然后进行下列操作。

1． 开启荧光显微镜或荧光分光光度仪

2． 小心抽掉25cm2细胞培养瓶里的培养液

3． 加入3毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液到细胞培养瓶，覆盖培养瓶表面

4． 小心抽掉清洗液，加入1毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，铺满整个培养平面

5． 置入37℃培养箱1分种

6． 振动培养瓶，使细胞脱落，加入5毫升用户自备的完全细胞培养液

7． 移入15毫升锥形离心管，放进台式离心机离心10分钟，速度为300g

8． 小心抽去上清液，加入1毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液，充分混匀

9． 移入到新的1.5毫升离心管

10． 加入xx微升染色液（Reagent A）到离心管，用手指轻轻弹动离心管，使其充分混匀

11． 在37℃培养箱孵育10分钟，避免光照

12． 放进微型台式离心机离心30秒，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）

13． 小心抽去上清液，加入1毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液，充分混匀

14． （选择步骤）放进微型台式离心机离心30秒，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）

15． （选择）小心抽去上清液，加入1毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液，充分混匀

16． 荧光显微镜观察

1） 移出10微升离心管中的混匀物到载玻片上

2） 放上盖玻片或封片

3） 在荧光显微镜下观察荧光细胞

文章出自：尼罗红染色实验     想了解更多请关注：http://www.vv-gene.com/