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VanGieson染色简称VG染色,是一种成熟的结缔组织染色方法,用于区别胶原纤维和肌纤维。其操作简单,结果可靠,是实验室常规特染方法之一。在Van Gieson 染色中品红和苦味酸的比例关系一般为1:9,但由于被染色的组织不同以及组织处理方法的不同在实际应用时应根据染色的实际效果进行必要的调整以达到红黄两色适当的对比。
染色步骤:
1、标本处理:固定过的冰冻切切直接用水洗两到三次;石蜡切片常规脱蜡至水(参考流程: 二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸馏水洗2min。)
2、苏木素染色5-10分钟。水洗1分钟。
3、将酸性复红和苦味酸以1:9比例混合,配成 VG染色液,染色30-60秒。
4、直接用分化液分化数秒。
5、脱水,透明,中性树胶封片。(参考流程100%乙醇(I)1min→100%乙醇(Ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3:1)1min→二甲苯(I)1min→二甲苯(Ⅱ)1min→中性树脂封固) 。
注意事项:
1. 穿实验服并戴一次性手套操作。
2.苏木素用于细胞核的染色,为便于组织结构的观察,染色时间可根据结果自行调整。
3. VG染色液配制的关键主要是酸性品红和苦味酸饱和液的比例。请自行根据结果调整。偏红增加苦味酸比例,偏黄增加品红比例。
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