H&E染色，全称为苏木精-伊红染色（Hematoxylin and Eosin staining），是病理学中最常用的染色方法之一。这种染色方法可以清晰地显示组织的形态结构和某些病理变化。H&E染色的原理主要涉及到染色剂和组织中的生物大分子（如蛋白质）之间的化学反应。苏木精是一种碱性染色剂，主要与含有酸性基团的组织成分（如DNA和RNA）结合，使其呈现蓝紫色。伊红是一种酸性染色剂，主要与含有碱性基团的组织成分（如胶原纤维和肌纤维）结合，使其呈现粉红色。

实验步骤：

1.  切片脱蜡：将包埋在石蜡中的组织切片放入两个装有二甲苯的容器中，每个容器中浸泡10分钟。这一步是为了去除切片中的石蜡。

2.  酒精脱脂：将切片转移到两个装有100%酒精的容器中，每个容器中浸泡10分钟。这一步是为了去除切片中的脂肪。

3.  酒精水化：将切片依次转移到装有95%酒精、70%酒精和50%酒精的容器中，每个容器中浸泡5分钟。这一步是为了使切片逐步水化。

4.  清水洗涤：将切片转移到装有清水的容器中，浸泡5分钟。

5.  苏木精染色：将切片转移到装有苏木精染色液的容器中，浸泡5-10分钟。

6.  清水洗涤：将切片转移到装有清水的容器中，浸泡1-2分钟。

7.  伊红染色：将切片转移到装有伊红染色液的容器中，浸泡1-2分钟。

8.  酒精脱色：将切片依次转移到装有95%酒精和100%酒精的容器中，每个容器中浸泡5分钟。

9.  二甲苯透明：将切片转移到装有二甲苯的容器中，浸泡10分钟。这一步是为了使切片变得透明。

10.  封片：将切片和封片用封片胶粘合，然后在显微镜下观察。

实验常见问题和措施：

1.  染色不均：可能是由于切片上的脂肪或蜡没有完全去除造成的。在染色前应确保切片充分脱蜡。

2.  染色过深或过浅：可能是染色时间过长或过短，或者染色液的浓度不适当。应根据实际情况调整染色时间和染色液的浓度。

3.  切片脱落：可能是切片固定不牢或处理过程中力度过大。应确保切片的固定牢固，处理过程中要轻柔。

文章出自：HE染色实验     想了解更多请关注：http://www.vv-gene.com/